4.2芽的诱导将接种后20d的无菌苗转移至培养基(1)上 , 5—7d茎尖开始萌动 , 10d腋芽萌动 , 芽逐渐长大 , 继续培养20d , 茎段上所有腋芽均萌发成侧枝 。 侧枝生长正常 , 叶片深绿色 , 茎基部愈伤组织较少 , 黄绿色 。
4.3试管苗的增殖将试管苗侧枝分割成2—3芽为一段 , 接种于培养基(2)上 。 10d后茎段叶芽萌动 , 30d长成大量侧枝 , 并有大量双生枝和三生枝产生 。 接种茎段形成具有5—8侧枝的丛生苗 , 平均增殖5.8倍 。 试管苗节间明显伸长 , 幼嫩叶片茎杆均呈淡红色 , 叶片大 , 茎杆较粗 , 组织不充实 , 茎基部愈伤组织大 。 以后每30d继代1次 , 经3—4次继代试管苗出现玻璃化现象 。
4.4壮苗培养将经增殖培养的试管苗每继代3—4次后转移至培养基(3)上 。 40d后形成大量侧枝 , 平均每茎段4—6侧枝 , 侧枝平均长1.8cm , 平均增殖3.1倍 。 基本无双生枝或三生枝 。 侧枝生长健;D , 组织充实 , 叶色深绿 , 基部愈伤组织小 , 黄绿色 , 无玻璃化现象 。
4.5根的诱导将生长健壮、长度大于1.2cm的侧枝分割 , 转移至培养基(4)上 。 提高光照度至2500—3000lx , 延长光照时间至每天16h 。 培养15d后开始有根原基形成 , 根原基形成后即可炼苗 。 20—25d调查生根情况 , 生根率73% , 每苗平均生根l—2条 。
4.6炼苗移栽将生根试管苗带瓶移人栽培温室 , 培养1周 。 当根长0.5—1omb寸 , 打开瓶盖炼苗3—5d , 将生根苗取出 , 洗净根部培养基 , 栽植于育苗穴盘中 。 以黑泥碳为基质 , 温度控制在20—25℃之间 , 湿度为85%—95%左右 , 20d即可成活 , 成活率达73%以上 。
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