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【植物】杜鹃花植物组织技术

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杜鹃花植物组织技术一、杜鹃花组培的基本技术环节

杜鹃花组织培养 ， 通常使用的外植体为茎尖、茎节和花蕾等 。 因花蕾的分化较为困难 ， 周期长；茎尖的取材受到一定限制 ， 故国内多采用茎节为初代培养的外植体 。

杀菌处理时 ， 杀菌能力较强的升汞（氯化汞）易造成外植体材料的褐变死亡 ， 不适合使用 。 试验表明 ， 采用饱和的次氯酸钙液上清液或5％的次氯酸钠液作为灭菌剂 ， 效果较好 ， 处理时间为15至20分钟 。 为加强灭菌效果 ， 还可加入1％的克菌丹或0.1％的吐温－20（山梨糖醇）配合使用 。 材料灭菌前的预处理 ， 通常采用70％酒精浸泡 ， 不超过30秒 。 此外 ， 用中性洗涤剂进行材料的预处理 ， 亦可有效降低其灭菌后的污染率 。 外植材料灭菌流程为：洗衣粉液浸泡20分钟?流水冲洗至清?70％酒精浸泡30秒?灭菌水冲洗1分钟?5％次氯酸钠浸泡15分钟,灭菌水漂洗3次 ， 每次1分钟 。 如此 ， 可将外植体污染率降低到15％以下 。

杜鹃花组培所用培养基 ， 为Andeson改良MS培养基：将MS培养基中的硝酸铵和硝酸钾用量分别减至1／4 ， 取消了碘化钾成分 ， 铁盐的用量增加一倍 。 因杜鹃花科植物的原产地在高山酸性土壤 ， 培养基的pH值宜为5.0至5.4 。 培养室温度25℃ ， 光照强度3000勒克斯 ， 光照时间12至14小时 。

杜鹃花在诱芽培养中使用的激素较一般植物有异 ， 需要活性较强的细胞激动素类物质 ， 才能达到满意的效果 。 试验表明 ， 使用ZT的诱芽效应最为显著；添加KT的处理几乎无丛芽或侧芽发生 ， 仅是原茎尖的伸长；而选用6－BA处理 ， 则导致培养材料的褐变加剧 ， 效果反不如对照 。 此外 ， 在其后的增殖培养中 ， 杜鹃花对细胞激动素种类的要求 ， 仍以添加ZT为好 。

国外在杜鹃花的组培中多使用2ip作为外源细胞激动素 ， 效果较ZT好 。 但从经济的角度考虑 ， 仍推荐使用ZT 。

二、杜鹃花的初代和继代增殖培养

杜鹃花初代诱芽培养 ， NAA浓度不得超过0.1mg／L ， ZT用量的增大对诱芽效应有明显促进作用 。 但提高ZT浓度时 ， NAA浓度不适合同步增加 ， ZT／NAA值较大为好 。 从经济培养的意义出发 ， 初代培养的激素配比以ZT5＋NAA0.01（mg／L）为宜 ， 培养1个月左右时 ， 诱芽率即可达100％ ， 诱芽系数6.5 。 【【植物】杜鹃花植物组织技术】

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