【【月季】月季组织培养技术】
月季组织培养技术一、培养意义
月季属蔷薇科蔷薇属多年生草本植物 , 每年多次开花 , 而且香味怡人 , 在观赏植物中地位很高 。 另一大优点是分布极广 , 适应性强 , 栽培容易 。 使得月季无愧于“花中皇后”之美誉 , 古今中外文人墨客咏叹月季的佳作 , 不胜枚举 。 多伦县就是一个月季之乡 , 但品种比较单一 , 更新换代缓慢 。 随着组织培养技术的应用 , 多伦县农业技术推广中心于2000年11月引进组织培养全套设备 , 成功培育了大量优质月季组培苗 , 填补了市场空白 , 对加速新老品种更新换代 , 迅速普及名优新品种起到了重要作用 。
二、培养程序
(一)无菌培养的建立
(1)选条
从中国科学院、中国农科院等一级科研机构引进6个月季优良品种 , 分别是“红双喜”、“白雪山”、“彩云”、“和平”、“皇冠”、“金丝鸟” 。 选取生长健壮的当年生枝条 , 用饱满而未萌发的侧芽作为外植体 。 以枝条中段芽最好 , 因为接种后 , 中段芽第5天左右就能萌发 , 而基部和梢部的芽往往迟至15天才萌发 。
(2)培养基的配制
整个培养过程都可用ms培养基 , 诱导芽萌发所加的植物激素只需要ba一种即可 , 每升用0.3~1.omg , 6个品种均适用 , 只是萌发迟早有些差别 。
(3)清洗外植体
采回的枝条切去叶 , 再剥去附在茎上的叶柄及皮刺 , 先整段用洗手刷沾浓洗衣粉水仔细刷洗 , 再用自来水冲洗 , 毛巾擦干 , 放置在小木板上 , 用利刀切成2~3厘米一段 , 每段至少一个侧芽 , 装入消毒过的培养皿 , 放在超净工作台上 , 打开紫外灯 , 做表面灭菌30分钟 。
(4)消毒与接种
在超净工作台上 , 用饱和漂白粉上清液作表面灭菌25~30分钟 , 灭菌时间快到时 , 即倾去灭菌溶液 , 用无菌水涮洗数次 , 无菌纱布吸干茎段外表水分 , 按无菌操作要求 , 接种到小试管里 , 从芽萌发到芽长到1厘米左右需要2~3周 。
(5)培养
培养温度21℃最好 , 最高不超过25℃ , 有昼夜温差 , 光照10~12小时/天 , 光强800~1200lx 。
(二)继代增殖
(1)将上述无菌芽从原茎段上切下 , 转接到ms+ba1-2+1aa0.1-0.3或ms+ba1-2+naa0.01-0.1的培养基上 , 促使嫩茎长出更多的侧芽 , 原茎段弃去 。 继代增殖培养基每升用蔗糖30克 。
(2)5周后 , “红双喜”增殖了3.5倍 , “白雪山”4.1倍 , “和平”、“彩云”5~6倍 , “皇冠”、“金丝鸟”达15倍 。
(3)每5~6周做一次继代增殖 , 继代前先制备好培养基 , 然后在无菌操作条件下 , 将月季嫩茎切成1~2节一段 , 投入新鲜的增殖培养基上 , 月季小苗就会按几何级数增殖起来 , 也可以将大苗转入到生根培养基上 。
(4)壮苗培养
①对增殖倍率高的品种 , 所增殖的嫩茎很细弱 , 要求进行一次壮苗培养 , 以取得适合生根和今后移栽的苗子 。 壮苗培养的培养基为:ms+ba0.3-0.5+naa0.01-0.1 , 如果并不特别强调繁殖速度 , 也可以一直使用这种培养基 , 以壮苗为主 , 增殖为辅 , 使增殖与壮苗合为一步 。 ②培养条件 。 光照10~12小时/天 , 光强800~1800lx , 温度20~23℃ , 最高24~26℃ 。
(5)生根与移栽
月季嫩芽生长到一定长度时 , 就应切割下来 , 转入生根培养基 。 切下的嫩芽长度以2~3厘米为宜 , 让幼苗基部伤口愈合 , 已长出根原基 , 幼根尚未长出 , 即出瓶种植 。 这种方法不会损伤根系 , 移栽速度快 , 成活率高 。
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