【杜鹃花】杜鹃花组织培养技术


杜鹃花组织培养技术杜鹃花为杜鹃花科杜鹃花属常绿或落叶小灌木 , 具有品种多、开花早、花色丰富、花期长等特点 。 近几年 , 由于扦插繁殖技术的发展 , 我国杜鹃花产量有了提高 。 但是 , 名贵品种因母本少、繁殖系数低 , 仍不能满足社会需要 。 而组织培养正是实现杜鹃花工厂化育苗的有效措施 。 下面将其简单介绍如下:

一、杜鹃花组培的基本技术环节

杜鹃花组织培养 , 通常使用的外植体为茎尖、茎节和花蕾等 。 因花蕾的分化较为困难 , 周期长;茎尖的取材受到一定限制 , 故国内多采用茎节为初代培养的外植体 。

杀菌处理时 , 杀菌能力较强的升汞(氯化汞)易造成外植体材料的褐变死亡 , 不适合使用 。 试验表明 , 采用饱和的次氯酸钙液上清液或5%的次氯酸钠液作为灭菌剂 , 效果较好 , 处理时间为15至20分钟 。 为加强灭菌效果 , 还可加入1%的克菌丹或0.1%的吐温-20(山梨糖醇)配合使用 。 材料灭菌前的预处理 , 通常采用70%酒精浸泡 , 不超过30秒 。 此外 , 用中性洗涤剂进行材料的预处理 , 亦可有效降低其灭菌后的污染率 。 外植材料灭菌流程为:洗衣粉液浸泡20分钟?流水冲洗至清?70%酒精浸泡30秒?灭菌水冲洗1分钟?5%次氯酸钠浸泡15分钟?灭菌水漂洗3次 , 每次1分钟 。 如此 , 可将外植体污染率降低到15%以下 。

杜鹃花组培所用培养基 , 为Andeson改良MS培养基:将MS培养基中的硝酸铵和硝酸钾用量分别减至1/4 , 取消了碘化钾成分 , 铁盐的用量增加一倍 。 因杜鹃花科植物的原产地在高山酸性土壤 , 培养基的pH值宜为5.0至5.4 。 培养室温度25℃ , 光照强度3000勒克斯 , 光照时间12至14小时 。

杜鹃花在诱芽培养中使用的激素较一般植物有异 , 需要活性较强的细胞激动素类物质 , 才能达到满意的效果 。 试验表明 , 使用ZT的诱芽效应最为显著;添加KT的处理几乎无丛芽或侧芽发生 , 仅是原茎尖的伸长;而选用6-BA处理 , 则导致培养材料的褐变加剧 , 效果反不如对照 。 此外 , 在其后的增殖培养中 , 杜鹃花对细胞激动素种类的要求 , 仍以添加ZT为好 。

国外在杜鹃花的组培中多使用2ip作为外源细胞激动素 , 效果较ZT好 。 但从经济的角度考虑 , 仍推荐使用ZT 。

二、杜鹃花的初代和继代增殖培养

杜鹃花初代诱芽培养 , NAA浓度不得超过0.1mg/L , ZT用量的增大对诱芽效应有明显促进作用 。 但提高ZT浓度时 , NAA浓度不适合同步增加 , ZT/NAA值较大为好 。 从经济培养的意义出发 , 初代培养的激素配比以ZT5+NAA0.01(mg/L)为宜 , 培养1个月左右时 , 诱芽率即可达100% , 诱芽系数6.5 。

杜鹃花继代增殖培养 , 对细胞激动素要求比初代培养有所下降 。 虽然增殖效应仍随ZT用量的增加而上升 , 但已不如初代培养时那么明显 。 此外 , 用于增殖培养的材料性质不同 , 其增殖效应也不尽相同 , 品种间亦存在显著的差异性 。 供试品种中 , ‘小桃红’以采用丛芽为增殖培养体时的增殖系数较高(7.6);而‘花春雨’则反之 , 以取用芽条时的反应为佳(7.5) 。

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