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如何制作玻片标本，制作玻片标本七步口诀( 二 )

小知识




2、其次， 完成上述步骤后， 切割植物材料：由于是横截面， 因此可以用镊子按压材料的一端， 用右手挤压刀片， 然后在主静脉的垂直方向上切割刀片 。
每次切割刀片时， 水都会被粘住， 放置一个薄而切割的叶子在装有淡水的培养皿中， 如下图所示， 然后进入下一步 。



3、接着， 完成上述步骤后， 材料选择：使用镊子从水中选择最薄的薄片， 将需要染色的材料滴在滑片上， 然后将薄刀片的切割表面平整并覆盖滑片， 并通过撕下洋葱皮而获取薄外皮， 如下图所示， 然后进入下一步 。



4、然后， 完成上述步骤后， 观察：观察整个透明刀片的横截面结构 。 跟随整个部分， 首先找到较小倍数的细胞内位置， 然后通过局部放大倍数调整亮度和倍数， 以获得更好的视觉和清晰度， 如下图所示， 然后进入下一步 。



5、最后， 完成上述步骤后， 清洁：清洗载玻片和培养皿， 安排设备， 将废物放入指定的容器中， 养成良好的实验习惯， 如下图所示 。

【如何制作玻片标本，制作玻片标本七步口诀】

如何制作树叶的玻片标本 石蜡切片（paraffin section） 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法 。 石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构， 也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法， 而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中 。 教学中， 光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的 。 活的细胞或组织多为无色透明， 各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差， 在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败， 失去原有正常结构， 因此， 组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡， 而能清晰辨认其形态结构 。

石蜡切片制作基本技术 石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤 。 一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日， 但标本可以长期保存使用， 为永久性显微玻片标本 。

1.取材 应根据要求选取材料来源及部位 。 例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖， 细胞分裂快又便于切取；猪的肝小叶边界清晰明确；耳蜗以豚鼠的内耳易于定位和剥离 。 材料必须新鲜， 搁置时间过久则产生蛋白质分解变性， 导致细胞自溶及细菌的滋生， 而不能反映组织活体时的形态结构 。

2.固定 用适当的化学药液——固定液浸渍切成小块的新鲜材料， 迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变化， 尽可能保持其活体时的结构 。 固定能使组织硬化， 有利于切片的进行， 而且也有媒浸作用， 有利于组织着色 。 固定液的种类很多， 其对组织的硬化收缩程度以及组织内蛋白质、脂肪、糖类等物质的作用各不相同 。 例如纯酒精可固定肝糖而能溶解脂肪， 甲醛能固定一般组织， 但溶解肝糖和色素 。 固定液可分为单一固定液及混合固定液 。 前者有甲醛（蚁醛、福尔马林）、酒精、醋酸或冰醋酸、升汞、锇酸（四氧化锇）、重铬酸钾及苦味酸等， 单一固定液不能固定细胞中的所有成分；混合固定液可以互补不足， 常用的混合固定液有Bouin氏液、Zenker氏液、FAA液、Carnoy氏液、SuSa液（配方见有关技术书籍） 。 因此， 应根据所要显示的内容来选择适宜的固定液 。 10％福尔马林（4％甲醛）或10％磷酸缓冲福尔马林是病理切片常规使用的固定液， 不仅适用于常规HE（苏木精-伊红）染色， 还可以用于组织学有关的其他技术的切片染色 。 固定液的用量通常为材料块的20倍左右， 固定时间则根据材料块的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定， 可以从1小时至数天， 通常为数小时至24小时 。

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