取材前 , 先将盆栽鹤望兰托出 , 把老叶、残叶和根系前除 , 用自来水冲洗24小时 , 除去叶片和基部5厘米以外的叶柄 。 留下的短缩茎 , 用70%酒精漂洗5分钟 , 然后放到9%次氯酸钙或0.3%氯化汞溶液中消毒15分钟 , 最后用无菌蒸馏水漂洗 。 消毒过的材料放入含有抗氧化剂的溶液中浸24小时 , 进行预处理 。 预处理溶液和含维生素、蔗糖和生长物质的MS液体培养液 , 再每升添加柠檬酸150毫克 , 维生素C100毫克 , 以及经过滤消毒的氯霉素、土霉素各5毫克和苯菌灵25毫克 , 溶液pH值调至4.5 , 在121℃1.1千克/平方厘米压力下消毒15分钟 。 预处理过的材料再用无菌水漂洗一次 , 用1%维生素C液漂洗2次 , 随即放在用1%维生素或0.04%的二硫苏糖醇浸过的滤纸上切取外植体 。 外植体分别从顶芽、带有二个叶基的茎节组织上(长度为0.4~0.5厘米)和花序轴上切取 。 固体和液体培养基均用改良的MS培养基 , 但大量元素减半 。 在液体培养基中含有0.04%过滤灭菌过的DTT , 在固体培养基中含有1%的活性炭 。
文章插图
诱导不定芽可用添加IBA2.5毫克/升、NAA1.0毫克/升 , KTS毫克/升和2 , 4-D0.5毫克/升的MS培养基 。 在固体培养基中加入间苯三酚150毫克/升能促进不定芽的生长 。
培养材料先在黑暗条件下培养10天 , 然后每天给予14小时光照 , 培养室温度保持23~25℃ 。
繁殖鹤望兰的方法鹤望兰组织培养成败的关键是防止培养过程中发生坏死现象 , 从周围组织发芽到长芽之前 , 为减少氧化褐变和促进苗的生长 , 可用0.3%氯化汞代替次氯酸钙消毒 , 可值受伤组织的氧化福变减轻 。 如果把外植体浸在含有柠檬酸和维生素C、pH值4.5的预处理溶液中12小时 , 也能减轻氧化褐变 。 浸24小时效条更好 。
鹤望兰多用播种和分枝繁殖 。 其种子坚硬黑似碗豆 , 种尖附有橙红色绒毛 。 需浸水4一5天 , 水温15℃ 。 充分吸水后播于瓦盆或硬塑盘中 , 基质温度达18一22℃为好 。 盛器用玻璃覆盖 , 以免鼠害 。
喷水保温 , 约20天左右出苗 , 要遮荫 。 当幼苗长到5一7厘米时 , 可移植泥盆内 。 以园田土4份、兰花泥3份 , 沙土2份 , 山泥1份混合为好 。 要浇透水 , 7月以后每半月施淡豆饼或1%营养液助长 , 也可施用磷酸二氢钾复合肥1:250液 。
9月开始控水 , 避免过湿 。 整个生长过程要避免阳光直射和过份干旱 。 当年能出叶4-5片 , 高20厘米左右 。 每年翻盆加土 , 长出12一14片叶时 , 由苗期转为花期 。
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