动物细胞培养原理及过程

本文目录 
1、什么是动物细胞培养
2、细胞增殖的意义
3、细胞通过分裂进行增殖
4、培养液成分
5、培养液特点
6、培养条件
7、基本过程

什么是动物细胞培养动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖 。

动物细胞培养原理及过程

文章插图
一、细胞增殖的意义:
1、细胞增殖是生物繁殖的基础:单细胞生物以细胞分裂的方式产生后代;多细胞生物的繁殖和发育的基础、
2、细胞增殖是高等生物完成正常生命活动的基础:细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础 。
【动物细胞培养原理及过程】二、细胞通过分裂进行增殖:
细胞增殖是细胞重要的生命活动,是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础 。
1、单细胞生物:细胞增殖而繁衍 。
2、多细胞生物:从受精卵开始,要进行细胞的增殖和分化逐渐发育成个体 。
3、真核细胞的分裂方式:有丝分裂、无丝分裂、减数分裂 。
培养液成分
体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同,例如,需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等 。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基,称为合成培养基 。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境,因此在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分 。
培养液特点
液体培养基、通常含动物血清 。
培养条件
无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染 。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害 。营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等) 血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份) 温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4) 气体环境(95%的空气+5%CO?的混合气体)其中5%CO?气体是为保持培养液的pH稳定
基本过程
取动物胚胎或幼龄动物器官、组织 。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液 。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁 。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制 。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理 。再配成一定浓度的细胞悬浮液 。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养 。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖 。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株 。当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变 。此时的细胞被称为细胞系 。
培养基添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取 。

    推荐阅读