蛋白质含量的测定方法有哪些


蛋白质含量的测定方法有哪些

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蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、folin―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等 。
1、微量凯氏定氮法:含氮有机物即分解产生氨(消化) , 氨又与硫酸作用 , 变成硫酸铵 。经强碱碱化使之分解放出氨 , 借蒸汽将氨蒸至酸液中 , 根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量 。
2、双缩脲法:双缩脲是两个分子脲经180℃左右加热 , 放出一个分子氨后得到的产物 。在强碱性溶液中 , 双缩脲与CuSO4形成紫色络合物 , 称为双缩脲反应 。
【蛋白质含量的测定方法有哪些】3、folin―酚试剂法:这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一 。过去此法是应用最广泛的一种方法 , 由于其试剂乙的配制较为困难 , 近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代 。
4、考马斯亮兰法:1976年由bradford建立的考马斯亮兰法 , 是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的 。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法 。
5、紫外吸收法:蛋白质分子中 , 酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键 , 使蛋白质具有吸收紫外光的性质 。吸收高峰在280nm处 , 其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比 。

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