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调解协议书签字后不能反悔 。人民法院进行调解，尊重双方真实意思，不得强迫，达成调解协议的，法院制作调解书，调解书经双方当事人签收后，即具有法律效力，不能够反悔 。
根据《民事诉讼法》第九十七条规定，调解达成协议，人民法院应当制作调解书 。调解书应当写明诉讼请求、案件的事实和调解结果 。调解书由审判人员、书记员署名，加盖人民法院印章，送达双方当事人 。调解书经双方当事人签收后，即具有法律效力 。
法律依据：
《民事诉讼法》第九十七条
【调解协议书签字后能反悔吗】调解达成协议，人民法院应当制作调解书 。调解书应当写明诉讼请求、案件的事实和调解结果 。调解书由审判人员、书记员署名，加盖人民法院印章，送达双方当事人 。调解书经双方当事人签收后，即具有法律效力 。
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