【【育苗】葡萄组培育苗技术要点】
葡萄组培育苗技术要点用组织培养法繁殖葡萄, 可达到优良葡萄快速育苗的目的, 以满足生产需要 。 同时也是工厂化育苗和脱毒苗木快速繁殖的重要手段, 并能常年进行, 缩短了苗木繁殖周期, 加快新品种的推广应用 。
一、试管苗的初代培养
葡萄组织培养初代培养, 其繁殖材料多取自大田, 常带有大量细菌和霉菌, 必须进行消毒方可获得无菌材料 。 材料采集在前三天无雨的晴天上午进行, 取带腋芽的葡萄半木质嫩茎, 剪取后立即拿入室内, 先用自来水反复冲洗, 除去病虫枝、残伤枝, 减除大叶片, 装入广口瓶进行消毒 。 用无菌操作技术, 倒入无菌水浸泡和冲洗, 倒去无菌水, 加入0.1%升汞(内加2%的95%酒精)浸没材料, 并剧烈摇动6分钟~9分钟, 剪去受伤端面, 剪成单芽茎段, 接入培养基中 。 每瓶插一段, 正插入内 。 标号后放到培养室培养, 一周后检查, 如未污染, 基本上不会再污染 。 通过对美人指、早红提等品种的生产, 取得了90%以上无污染成苗率 。
二、试管苗的继代繁殖
对初代培养合格或引进的试管苗, 一般采用MS、B5、GS等培养基, 具体做法如下:
1.穿好工作服, 戴上工作帽, 用洁净的水洗手, 再用75%的酒精棉球擦手消毒 。
2.取无菌原种苗瓶放于超净台, 用75%酒精棉球仔细擦试包头纸及苗瓶外体, 并解开包头纸捆扎线绳 。
3.将弯剪刀、枪状镊子浸入75%酒精中, 用时取出在火焰上烧15秒~30秒, 凉冷备用 。
4.将无菌原种苗瓶的包头纸连同棉塞一同拔下, 放在超净台一旁, 瓶口在火焰上烧5秒~10秒, 用冷却的剪刀将瓶内小苗剪成单芽茎段, 下端稍长, 上端较短, 但剪口距芽至少0.5厘米以上 。 母株基部要留一芽, 使其再发 。 剪下的单芽茎段, 用无菌镊子逐个夹出, 放入新的培养基瓶内, 并使叶子和芽露出培养基上方 。 150毫升三角瓶插5个左右茎段, 插完后将瓶口在火焰上转动烧一遍, 旋好棉塞和包上包头纸, 用绳扎好, 注明名称和时间等 。 如此反复的接好所有苗子, 并放到培养室 。 一般每月转接增殖3次 。
三、试管苗的培养
将接种后的培养苗瓶, 放在培养室的培养架上, 培养室昼夜温度保持在22℃~28℃, 新转接的苗瓶应放在培养架上层, 上层温度略高易于生根 。 培养室的湿度以70%为宜, 光照2000~3000勒克斯的日光灯 。
四、移栽
时期多在冬季或春季进行 。
1.光培炼苗 。 培养室培养的试管苗生长达瓶口, 有3枚~4枚正常叶片时, 根系生长良好, 连同培养瓶转入温室或大棚内, 逐步去掉瓶塞, 放在干净的温室中, 在2万~4万勒克斯的自然光下炼苗5天~7天, 当瓶口长出油亮的叶片, 幼茎变淡红色时即可出瓶 。
2.沙培炼苗 。 最好备有下铺电热线并能调节温度的沙床, 使床温维持在25℃左右 。 以0.6厘米间距布置电热线, 其上铺垫2厘米的土, 压平, 再铺8厘米~10厘米的干净细河沙, 湿度以12%左右, 即手捏成团落地能散 。
清晨或傍晚, 将培养瓶内的幼苗轻轻倒出, 洗掉根上附着的培养基, 栽入沙床, 3厘米~4厘米株距, 8厘米~10厘米行距, 每平方米大约栽400苗~500苗 。 栽入沙床后, 盖好小拱棚, 最初3天, 棚内温度保持在25℃左右, 最高不超过30℃, 最低不低于20℃ 。 相对湿度保持在80%~95%;光照0.7万~1万勒克斯 。 6天~7天后, 拆除临时小拱棚 。
3.温室营养袋炼苗 。 经沙培后的合格苗, 小心挖出, 在空气湿度不低于70%, 温度20℃~25℃, 无直射光下, 栽入肥土:沙:腐熟有机肥为1:1:0.2的营养钵中, 最初几天对温、光、湿的管理同沙培苗相同 。
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