紫萁组织培养的探讨二结果与分析
3．1孢子粉与孢子囊消毒效果比较
由表1可知， 孢子粉的消毒效果比孢子叶小叶效果差， 不仅污染率高， 而且容易褐化死亡， 继续培养无孢子萌发．小叶的孢子处在孢子囊壳的包被保护之中， 受外界病菌侵染程度轻， 表面消毒时受消毒液的影响也较小．此外， 孢子粉个体微小， 表面消毒操作难度大， 且由于经过干燥散落的后熟过程， 夹杂的杂物较多， 生活力会有所降低．故以孢子叶小叶整体表面消毒比孢子粉消毒要理想的多．
3．2不同激素对紫萁孢子萌发的诱导效应 。
由表2可以看出， 培养基中激素的浓度高低对孢子萌发无显著影响， 不加任何激素与附加低浓度激素(低于1．0mg／l)， 同样有很高的孢子萌发率， 但浓度太高(2．o～5．0mg/l)会抑制孢子萌发．另一方面， 无机盐浓度对孢子萌发影响较大， 较低的无机盐浓度促进孢子萌发， 将ms培养基中无机盐浓度减半是合适的．
3．3不同糖浓度对孢子萌发率的影响
由表3可知， 糖浓度对孢子萌发影响较大， 在2％～3％范围内较合适， 低于2％和高出4％， 孢子萌发率明显降低．以食用白砂糖代替化学纯蔗糖， 对孢子萌发率基本上无影响， 取材方便， 且可降低费用成本．
3．4不同影响因子对原叶体的增殖效应
3．4．1温度对原叶体的增殖效应
由表4可知， 培养温度对原叶体增殖影响较大， 25"c左右是原叶体增值的适宜温度， 低于20"c或昼
夜有温差波动都对原叶体增殖有抑制作用．无机盐浓度对原叶体增殖无明显影响， ms和1／2ms培养基均
适合原叶体增殖生长．
3．4．2活性炭与kh2p04对原叶体的增殖效应
由表5可知， 培养基中附加少量活性炭和kh2p04对原叶体增殖和生长有促进作用．原叶体在增殖生长过程中， 对p、k元素的需求量大， 大棚人工播撒孢子繁殖试验中， 在原叶体增殖生长时期隔天喷施200mg/lkh2p04溶液代替浇水， 对原叶体旺盛生长有明显的促进作用， 在组培中效仿也是合适的．活性炭可以吸附培养基中积累的有害物质， 从而更利于原叶体的增殖和生长．
3．4．3不同激素对原叶体的增殖效应
由表6可知， 不同激素对原叶体增值的影响较明显．6-ba和naa在较低浓度时， 对原叶体增殖效果较好， 当浓度高于2．0mg／l时反而对原叶体生长不利， 出现白化苗现象；2,4-d对原叶体增殖效果较好， 但片状体皱褶严重， 不舒展饱满；高浓度的kt有利于原叶体的增殖和生长．
由表7可知， 6-ba0．5mg／l+naa0．5mg/l、6-bal．0mg／l+naa0．5mg／l、naa0．5mg／l+kt5．0mg／l和naal．0mg／l+kt5．0mg／l都能促进原叶体增殖， 并能生长良好．6-ba0．5mg／l+naal．0mg／l分化出假根的能力最强， 可用于孢子体生根培养基．
3．5炼苗与移栽
孢子囊无菌培养约四个月后， 在浓绿肥厚的原叶体上开始出现幼孢子体， 在培养基营养供给充足的条件下， 20d左右即可进行炼苗．由于离体条件培养下的再生植株长期在营养丰富的无菌条件下生长， 根系活动能力低， 直接移入土壤中栽培对外界环境适应力极差， 成活率极低．在培养室条件下选择3条根以上、根系粗壮、3叶以上且叶长3,～4cm的绿色完整植株， 置于大量元素稀释100倍的培养液浸泡过的干净沙砾中培养一周， 其间要经常用纯净水清洗去根上残余的琼脂， 不断补充培养液， 使植株逐渐适应外界环境．再转移至室内自然条件下培养一周后， 接入配备好的砂土中栽植， 细心管理， 半个月后可移至室外， 成活率可达80％．另在遮阳网大棚内保持湿度90％以上， 保持温度20-28℃， 散射光照条件下， 以同样基质炼苗移栽， 效果也较好， 成活率可达60％．炼苗时间过短， 砂培改为水培， 成活率均有下降．
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