怎样判断兰花是组培的,组培的兰花能变老种么( 四 )
2 培养基的配制和灭菌
3 接种室及用具消毒
4 材料灭菌:70%酒精,氯化汞
5 接种
6 无菌培养
三,选材和灭菌方法
从低等的藻类到苔藓,蕨类,种子植物等高等植物的各类,各部分都可采用作为组织培养的材料,一般裸子植物多采用幼苗,芽,韧皮部细胞,被子植物采用胚,胚乳,子叶,幼苗,茎尖,根,茎,叶,花药,花粉,子房和胚珠等各个部分.
由于植物在自然条件下,表面常被霉菌和细菌污染,故材料必须进行灭菌处理.一般用漂白粉溶液(1~10%),次氯酸钠溶液(0.5~10%),升汞溶液(0.01%),乙醇(70%)或过氧化氢(3~10%)等处理后,再用无菌水反复冲洗至净,然后在无菌室内,将所取的组织迅速培养在固体培养基上.在适宜的条件下,受伤组织切口表面不久即能长出一种脱分化的组织堆块,称为愈伤组织(Callus).
四,培养条件
(一)温度: 对大多数植物组织20~28℃即可满足生长所需,其中26~27℃最适合.
(二)光: 组织培养通常在散射光线下进行.光的影响可导致不同的结果.有些植物组织在暗处生长较好,而另一些植物组织在光亮处生长较好,但由愈伤组织分化成器官时,则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和根.有些次生物质的形成,光是决定三因素.
(三)渗透压: 渗透压对植物组织的生长和分化很有关系.在培养基中添加食盐,蔗糖,甘露醇和乙二醇等物质可以调整渗透压.通常1~2个大气压可促进植物组织生长,2个大气压以上时,出现生长障碍,6个大气压时植物组织即无法生存.
(四)酸碱度: 一般植物组织生长的最适宜pH为5~6.5.在培养过程中pH可发生变化,加进磷酸氢盐或二氢盐,可起稳定作用.
(五)通气: 悬浮培养中细胞的旺盛生长必须有良好的通气条件.小量悬浮培养时巨常转动或振荡,可起通气和搅拌作用.大量培养中可采用专门的通气和搅拌装置.
番茄无菌苗愈伤组织培养
1 培养基配制
2 接种和培养
接种--在无菌条件下,将灭过菌的材料,经适当切割,转移到培养基上.
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