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【玫瑰】玫瑰组织培养的研究( 二 )

种植知识 玫瑰



2.3.2外植体类型?摇aren等（1993）详细地调查了rosehybridacvmeirutral不同外植体的愈伤诱导率 ， 发现不同外植体愈伤产生的能力不同 ， 叶为90% ， 根为70% ， 节间为55% ， 花药为19% 。

2.3.3激素激素也是影响愈伤生成的重要因素 ， rout等（1991）以landora为材料 ， 在添加ba和naa ， 2 ， 4-d的ms的培养基上 ， 外植体在接种的7～12d后 ， 在近轴面的叶柄和中脉处产生愈伤 ， 愈伤组织诱导频率高达92% 。 在接种后15～20d ， 外植体茎切端处产生愈伤 ， 诱导率为76% 。 生长素种类和浓度对愈伤产生能力的影响同样很大 。 早期实验多采用naa结合bap或ba等 ， 近年来多采用2 ， 4—d ， 并证明2 ， 4—d是诱导愈伤的必要因素（kintzios等 ， 1999；rout等 ， 1996；vandersalm等 ， 1996；vises—suwan等 ， 1997） 。 进一步研究发现2 ， 4-d对愈伤的诱导效果依赖于月季的基因型 ， 如2 ， 4—d浓度从113umol/l增加到181umol/l降低了rosehybrida栽培种“care-freebeauty”的愈伤诱导频率 ， 但该浓度则对另一个品种“grandgala”无影响 。 对于“redsunblaze”而言 ， 当浓度从113umol/l增加到452umol/l ， 则表现出愈伤的诱导率提高了 ， 随后当2 ， 4—d再增加 ， 则显著地降低愈伤的诱导频率 。 愈伤组织在诱导愈伤组织的培养基上能得到很好继代培养（subculture、li等 ， 2002） 。 vandersalm等（1996）证明2 ， 4—d对诱导rosepersica与xanthina和moneyway产生愈伤是非常必要的 ， 进一步添加低浓度的ba有正效应 ， 但如ba浓度过高 ， 则产生抑制作用 。 与以上实验结果不同 ， kintzios等（1999）则发现2 ， 4—d对愈伤诱导有负影响作用 ， 可能因为采用的外植体是成熟的叶片 。

2.3.4合子胚的发育时期对愈伤的形成能力也有影响?摇如处于心形胚的合子胚 ， 其愈伤诱导率只有2% ， 子叶胚时的合子胚愈伤诱导率达到85% 。 ［7］

2.4不定芽的诱导月季的常规繁殖方式主要靠扦插、嫁接和压条等 ， 繁殖系数低 ， 远远满足不了生产的需要 。 80年代初 ， 采取组织培养方法快速繁殖月季苗 ， 用侧芽、顶芽、并诱导生根 。 第一报道月季不定芽形成见elliott(1970) ， 他在聚花月季（rosemultiflora）上成功地诱导了不定芽的形成 ， 并诱导幼苗生根 。 zieslin和halevy(1976)报道细胞分裂素有利于提高不定芽的数量 ， 但也诱导花器官败育或退化的频率 。 不定芽的诱导与供试材料的基因型有关 ， 同时还与外植体的取材部位有关 ， 来源于枝条中部的侧芽的繁殖速率最快（bressan等 ， 1982） 。 培养基中添加蔗糖有增加丛芽数量的作用（langford和wainwright ， 1987）；加入低浓度的ga能进一步改善芽繁殖 ， 95%的外植体能产生7个以上的不定芽（rout等1990） 。 能提高芽繁殖数量的物质还有月桂酸甲酯（voyiatzi等 ， 1995）、乙烯（kevers等 ， 1992）等 。 诱导不定芽的培养基为ms培养基添加低浓度的激素bap03～05mg/l ， naa0004～03mg/l或iaa或ga00～20mg/l 。 ［7］martin等（1981）调查了2125个玫瑰侧芽做外植体获得的无菌苗三年间在大田生长的情况 ， 没有发现变异植株 ， 这说明侧芽方式繁殖的玫瑰植株性状很稳定 。

2.5增殖培养玫瑰的增殖培养 ， 一靠无菌苗切段繁殖 ， 二靠诱导不定芽 ， 形成从生苗；三靠愈伤组织形成体细胞胚或原球胚 。 将已长大的月季嫩茎切成带1～2个节的茎段 ， 投入新鲜的增殖培养基上 ， 5～6周进行一次继代增殖 ， 增殖系数平均达4～6 。 在外植到培养10～15d内第一叶的叶原基伸长 ， 第二叶片叶原基可见；15～20d侧芽伸长；25～30d长度达6～10mm ， 继代增殖会按几何级数增长起来 。 ［5］增殖培养基可用不定芽诱导培养基 ， 如ms+ba03～05+naa0004～03mg/l 。

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