与外植体自身带菌所产生的污染相比,操作污染和环境污染是可以克服的 。 在组培生产中 ， 真菌的污染一般与环境有关 ， 细菌污染与接种材料及工具有关 。 生产中要通过定期做好对接种室与培养室消毒工作 ， 减少环境中的微生物数量 ， 减轻对污染的危害 ， 为此 ， 在接种前接种室要认真做好消毒工作 ， 且超净工作台在接种前 ， 认真擦洗 ， 紫外灯要开20～30min左右 。 培养室的相对湿度应控制在70％左右 ， 对每件物品放到超净工作台上 ， 都要用75%酒精认真擦洗一遍 ， 方可放到台面上 ， 只有这样在一定程度上可控制污染程度 。
（三）操作人员严格遵守无菌操作规程
接种人员在接种操作中 ， 应严格遵守无菌操作规范要求 。 接种人员的工作服、口罩、帽子等布质品要定期进行湿热灭菌 ， 在超净工作台的操作区内 ， 不要放入过多的待用物品 ， 避免气流被挡住产生污染 。 定期清洗或更换超净工作台过滤器 ， 接种前15～20min打开风机 ， 风速调整到20～30m/min ， 并对台面用75%酒精喷雾消毒 ， 工作人员进入操作室前必须对工作服、鞋帽进行消毒处理 ， 进入接种室必须换上消毒过的鞋帽 ， 接种前 ， 接种人员必须认真洗手 ， 还要用70%的乙醇棉球擦拭双手 ， 只有接种过程中严格遵守操作要规范 ， 才可避免因人为因素造成污染 。
（四）培养基及接种工器具要严格灭菌 ， 确保灭菌质量
在对培养基和接种工具灭菌时 ， 要先检查灭菌锅的使用情况 ， 发现问题要立即检修 。 在灭菌过程中要绝对保证灭菌应达到的压力、时间 ， 确保灭菌质量 。 一般要求压力应达到0.1个大气压 ， 时间维持在15～20分钟 ， 并且压力表降到零后不能马上出锅 ， 防止外界环境的冷空气倒吸入已灭菌的培养瓶内引起真菌污染 ， 应待锅内稍冷却后再出锅 。 对组培生产过程中培养容器封口采用塑料盖、胶塞、棉塞、薄膜等材料 ， 在使用前要认真做好清冼和消毒工作 ， 不符合要求坚决不用 。 在分装培养基时 ， 勿触瓶口 ， 防止培养基粘在瓶口上 ， 引起污染 ， 瓶口封好后要检查封口是否破损 ， 扎瓶口位置适当 ， 松紧适宜 。 对已污染组培瓶要经高压灭菌后再清洗 。
（五）在培养基中加入适量的抗生素
这是目前较常用的方法 ， 抗生素可以直接加入到培养基中 ， 也可以用抗生素喷洒或浸泡外植体 。 但植物种类不同 ， 所用抗生素的种类、浓度和处理时间也不同 ， 因此必须对不同植物采用不同的抗生素的种类、浓度和处理时间进行实验探讨 。 一般来说 ， 为消除革蓝氏阳性菌对有些木本植物污染茎段组培苗 ， 可以在培养基中加入四环素、头孢等混合物 ， 可使细菌完全被消除 。 另外用头孢菌素ⅱ消除某些观赏植物外植体中的内生菌也有非常明显的效果 。
（六）利用病毒在植株体内分布不均匀的原理 ， 生产脱毒苗
主要是针对在植物内部寄生的病毒 ， 因病毒在生长点区域几乎不存在 ， 且病毒也难以长到顶芽的分生组织 ， 所以切取顶芽的分生组织进行组织培养 ， 通过组织培养技术就可培养成无病毒植株 ， 而且脱毒效果好 ， 后代遗传性稳定 ， 所以是目前生产无病毒苗最安全、最重要的一条途径 。
（七）利用培养基中高盐或高糖的浓度 ， 抑制微生物的生长
在培养基中有一些高盐或高糖的浓度可抑制微生物生长 ， 或单宁酸存在时也可以达到抑制微生物生长的效果 。
（八）减少培养基中的某些有机成分 ， 可抑制微生物的生长繁殖
培养基中有机物如vb1、vb6、烟酸等有机成分 ， 是某些细菌生长的必需物质 ， 除去这些有机物后 ， 细菌无法生长发育 ， 逐渐死亡减少 。 这样也可以在一定程度上减轻污染所带来的危害 。
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